卵黃抗體的分析（上海精宏GNP-9270使用）

1 材料 

1. 1 疫苗與試驗動物

雞新城疫活疫苗( La Sota 株) ，購自哈藥集團生 物疫苗有限公司; 雞新城疫滅活疫苗( Ulster 2C 株) ， 購自南京梅里亞動物保健有限公司; 美國王鴿( 約 1 000 只) ，淇縣某鴿場提供; 健康羅斯公雞( 2 kg 左 右) 2 只，市購。

1. 2 主要試劑

檸檬酸鈉( 分析純) ，購自天津市北辰方正試劑 廠; 氯化鈉( 分析純) ，購自天津市恒興化學試劑制造 有限公司; 氯仿( 分析純) ，購自洛陽昊華化學試劑有 限公司; 碘酊，購自德州欣瑞達消毒制品有限公司; 醫 用乙醇，購自洛陽市潔康消毒劑廠。

1. 3 主要儀器

離心機( 型號為 80－2) ，購自上海手術器械廠; 移 液器( Ｒesearch plus) ，購自德國 Eppendorf 股份有限 公司; 天平( 型號為 HC－C) ，購自慈溪市華徐衡器實 業有限公司; 超凈工作臺( 型號為 SW－CJ－2F) ，購自 蘇州 凈 化 設 備 有 限 公 司; 生 化 培 養 箱 ( 型 號 為 GNP－9270) ，購自上海精宏實驗設備有限公司; 高壓 蒸氣滅菌器( 型號為 LDZX－30KAS) ，購自上海申安 醫 療 器 械 廠; 冰 箱 ［型 號 為 BCD － 610 W( KA92NV02TI) ］，購 自 波 西 化 電 器 ( 安 徽) 有 限 公司。

2 方法

淇縣某鴿場美國王鴿( 約 1 000 只) 在 4 月齡時 用雞新城疫滅活疫苗( Ulster 2C 株) 免疫，8 月齡時再 免疫 1 次，均為胸部肌肉注射，0. 4 mL /只，10 月齡時 進行樣本采集。用 1 mL 無菌注射器從健康產蛋母鴿 翅靜脈采集血液，每只鴿采集 1 份，共采集18 份， 0. 5～0. 8 mL /份，置于 1. 5 mL 無菌離心管中，做好標 記，4 ℃保存，備用。同時收集對應編號母鴿所產的 鴿蛋 18 枚，做相同編號標記，4 ℃保存，備用。在超凈工作臺中，用碘酊擦拭鴿蛋，再用乙醇脫 碘; 用無菌鑷子敲破鴿蛋蛋殼，將蛋內容物置于滅菌 單層紗布( 呈漏斗狀蓋于一個滅菌燒杯上，用滅菌棉 線扎緊) 上，讓蛋清慢慢流入燒杯; 收集卵黃，將其置 于另一個滅菌燒杯中，用滅菌玻璃棒充分打碎卵黃， 使卵 黃 呈 液 狀。取 卵 黃 原 液 1 mL 置 于 滅 菌 的 1. 5 mL 離心管中; 另取 1 mL 卵黃原液置于滅菌的 15 mL 離心管中。卵黃原液和卵黃抗體提取液均－20 ℃ 保存，備用。

3 結果與分析

制備的血清樣品呈黃色，黏 稠度高于提取的卵黃液，但遠低于卵黃原液，易于吸 取; 提取的卵黃液透明、清亮，非 常稀薄，容易吸取; 卵黃原液呈深黃色，非常黏稠，不太容易吸取，吸取時吸頭外常有 卵黃原液殘留。

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