鼓風(fēng)干燥箱的間充質(zhì)轉(zhuǎn)化指標(biāo)研制

1 材料

倒置光學(xué)顯微鏡: 日本 Olympus; 402AI 超聲霧化器: 江蘇魚躍醫(yī)療設(shè)備有限公司; RM2145 切片 機(jī): 德 國 Leica; HI1210 展 片 機(jī): 德 國 Leica; Leica HI1220 烤片機(jī): 德國 Leica; 醫(yī)學(xué)圖象分析軟 件 IMS 細(xì)胞圖象分析系統(tǒng): 上海申騰信息技術(shù)有限 公司; KUBOTA5200 離心機(jī): 日本久保田株式會社; 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱: 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng) 1 周，按體質(zhì) 量由小到大編號，采用完全隨機(jī)法分為正常組、模 型組、地塞米松組、宣肺平喘方高劑量組( XFPC 高 劑量組) 、宣肺平喘方中劑量組( XFPC 中劑量組) 、 宣肺平喘方低劑量組 ( XFPC 低劑量組) ，每 組 各 10 只。

2 實(shí)驗(yàn)方法

末次給藥后 24 h 后，各組大鼠均 以 25% 烏拉坦( 0. 4 mg /100 g) 腹腔注射麻醉后剖 胸，先分離頸前組織，結(jié)扎右支氣管，暴露氣管并于 其上剪開小口，插入靜脈留置針至一定深度，結(jié)扎 固定后緩緩拔出套管針，以 3 mL 生理鹽水分 3 次行 全肺灌洗，反復(fù)沖洗 2 遍，共 3 次 6 遍，回收支氣管 肺泡灌洗液( BALF) ，余置于 15 mL 離心管內(nèi)離心 3 500 r/min、4 ℃條件下低溫離心 20 min，取細(xì)胞沉 淀涂片、瑞氏染色后在油鏡下作白細(xì)胞分類計數(shù)， 余置 － 20 ℃ 低溫冰箱保存待測。取右肺上葉組織 置于 4% 的多聚甲醛中固定，備病理組織學(xué)檢測。 取大鼠腹主動脈血，涂片，余置于 15 mL 離心管內(nèi)， 3 500 r/pm、4 ℃條件下低溫離心 20 min，移取上清 血漿入 1. 5 mL 離心管，置 － 20 ℃ 低溫冰箱保存 待測。模型組大鼠經(jīng)卵白 蛋白霧化激發(fā)后，出現(xiàn)呼吸急促，張口喘息，腹部翕 動，煩躁不安，易激惹等現(xiàn)象，且皮毛干枯、稀疏，飲 水增多，活動與飲食減少，精神不振，動作遲緩，身 體消瘦。

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