鬼燈籠提取物分析（精宏培養箱使用）

鬼燈籠( Clerodendrum fortunatum L． ) 又名燈籠草， 為馬鞭草科植物白花燈籠的莖、葉，主產于廣東、廣西， 微苦、微甘，性涼，有清熱止咳、解毒消腫的功效，主治 肺癆咳嗽、骨蒸潮熱、跌打損傷、咽喉腫痛、癤腫疔瘡。 鬼燈籠根有清熱解毒、涼血消腫的功效，主治感冒發 熱、咳嗽、咽痛、跌打腫痛等。有研究表明，白花燈 籠水提取物和醇提取物有較強的抗補體活性。

1 儀器與材料

1． 1 儀器

RE52AA 旋轉蒸發儀( 上海亞榮生化儀器廠) ; 電 熱恒 溫 培 養 箱 ( 上海精宏實驗設備有限公司) ; GI54DWS 型高壓蒸汽滅菌箱。

1． 2 菌株及培養基

金黃色葡萄球菌、金黃色葡萄球耐藥菌、銅綠假單 胞菌、大腸埃希桿菌、表皮葡萄球菌、傷寒沙門氏菌、糞 腸球菌、屎腸球菌、無乳鏈球菌和化膿性鏈球菌均為標 準菌株，購自中國藥品生物制品檢定所; 營養瓊脂培養 基( 杭州濱和微生物試劑有限公司) 。

1． 3 藥材

采自廣西北流市，經廣西植物所寧世江鑒定為馬 鞭草科植物白花燈籠( Clerodendrum fortunatum L． ) 的 全株

2 方法與結果

2． 1 樣品的制備

鬼燈籠水提物: 稱取鬼燈籠藥材粗粉 20 g，加入 10 倍量的水冷浸 1 h，煎煮 2 次，每次 1 h，過濾，合并 2 次濾液，濾液用旋轉蒸發儀進行減壓濃縮，制成含藥 量為 1 g /mL 的藥液，冷藏備用。 鬼燈籠 70% 乙醇提物: 稱取鬼燈籠藥材粗粉20 g， 加入 10 倍量的 70% 乙醇先冷浸 1 h，然后回流提取 2 次，每次 1 h，過濾，合并 2 次濾液，濾液用旋轉蒸發 儀進行減壓濃縮，制成含藥量為 1 g /mL 的藥液，冷藏 備用。 將鬼燈籠水和 70% 乙醇提取物，各配制成含相當于 原藥材濃度為 1 000 mg /mL，500 mg /mL，250 mg /mL， 125 mg /mL，62． 5 mg /mL，31． 3 mg /mL，15． 6 mg /mL， 7． 8 mg /mL，3． 9 mg /mL，1． 9 mg /mL 的濃度系列。

2． 2 菌懸液的制備

將 10 種活化培養后的菌株接種于無選擇性的 LB 瓊脂培養基上，按照相應培養條件培養。挑選新鮮 菌落，懸浮于生理鹽水中，振蕩混勻，以 0． 5 號麥氏比 濁管為標準，調整細菌濃度為 1． 5 × 106 cfu /mL 的菌 量，備用。

2． 3 紙片藥敏實驗

無菌條件下，將上述 10 種菌株混懸液分別接種到 普通營養培養基表面，每種細菌平行接種 3 個平板，將 藥敏片貼于平板上，每個平板貼 4 片，其中一片為陰性 對照。37 ℃ 培養 24 h，24 h 后觀察抑菌效果。在 紙片周圍抑菌濃度范圍內，測試菌的生長被抑制形成 透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映了測試菌對鬼燈籠提取物的敏感程度。

2． 4 MIC 實驗

將定性濾紙制成的 6 mm 圓形紙片，滅菌烘 干后，分別取若干紙片浸泡于上述 20 份溶液中 2 h，烘 干后備用; 浸泡于無菌蒸餾水中做陰性對照，其他處理 條件同前。

3 結果

鬼燈籠的水提物和 70% 乙醇提取物對革蘭陽性 菌如金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌顯著的抑制其生 長，但對金黃色葡球耐藥菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希 菌、傷寒沙門氏菌、糞腸球菌、屎腸球菌、無乳鏈球菌和 化膿性鏈球菌則無抑制其生長的作用; 而 70% 乙醇提 取物對化膿性鏈球菌有一定抑制生長。

4 小結

鬼燈籠有清熱止咳、解毒消腫的功效。體外抑菌 實驗結果表明，鬼燈籠水和 70% 乙醇提取物均對金黃 色葡萄球菌和表皮葡萄球菌均具有明顯的抑菌作用， 水和 70% 乙醇提取物對金黃色葡萄球菌的最小抑菌 濃度均為 125 mg /mL; 而對表皮葡萄球菌的最小抑菌濃 度上有差別，水提物的最小抑菌濃度為 62． 5 mg /mL， 70% 乙醇提取物的最小抑菌濃度為 32． 25 mg /mL。鬼 燈籠的水和 70% 乙醇提取物所含成分比較復雜，至于 何種成分起作用有待下一步研究，本實驗的研究結果 將為鬼燈籠不同部位的抑菌能力考察提供一定依據。



 

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