上海精宏DHG-9076A在慢性腎衰竭大鼠腎功能分析的

慢性腎功能衰竭為多種慢性腎臟病緩慢惡化發 展的最終結果，由于其臨床癥狀可引發多方面并發 癥，而且病理基礎復雜，導 致 死 亡 率 逐 年 攀 升，透析清除腎內代謝廢物和腎移植可顯著降 低患者死亡率，延長生命周期，但前者技術復雜， 費用高昂，并發癥多，次數過于頻繁; 后者需要等 待合適的腎源等。核轉錄因子信號通路能調控 核內相應靶基因進行轉錄或表達，影響炎癥介質合 成，誘導炎癥反應，導致腎臟損害及腎纖維化，慢 性腎功能衰竭大多與腎功能炎癥相關，進一步加重 衰竭進展。

1 材料

1. 1 藥材

冬瓜皮購于贛州益豐大藥房醫藥連鎖 有限公司，經江西中醫藥大學中藥鑒定教研室吳啟 南教授鑒定為葫蘆科植物冬瓜 Benincasa hispida ( Thunb．) Cogn． 的干燥果皮。采用烘箱加熱制炭， 即將冬瓜皮放到托盤上 ( 平鋪 1 cm) 置于烘箱中， 制炭溫度 280 ℃，制炭時間 15 min，粉碎，?。?0 目、＞100 目的細粉，用時加雙蒸水配制成 3%、 4. 5%、6%混懸液。

1. 2 動物

SPF 級 Wistar 雄性大鼠 72 只，體質量 160～180 g，由南方醫科大學動物中心提供，動物 使用許可證號 SYXK ( 粵) 2016-0167。

1. 3 試劑

腺嘌呤 ( 上海索寶科技有限公司，批 號 A8330) ，用時加蒸餾水配制成 2. 5%混懸液，置 于 4 ℃ 冰箱中，混勻后使用; 肌酐試劑盒 ( 批號 D170214) 、尿素氮試劑盒 ( 批號 L160333) ( 上海 復星長 征 醫 學 科 學 有 限 公 司) ; TGF-β1、PAI-1 ELISA 試劑盒 ( 南京建成生物工程研究所，批號 150321、160088) ，NF-κB p65 兔抗大鼠一抗 ( abcam) 。愛西特 ( 藥用炭片，河北長天藥業有限公 司，國藥準字 H13022797) 。

1. 4 儀器

DHG-9076A電熱恒溫鼓風干燥箱 ( 上海精宏實驗設備有限公司) ; Bio-Ｒad 680 酶標儀、 PCＲ 儀、凝膠成像系統 ( 美國 Bio-Ｒad 公司) ; 移 液器、高 速 低 溫 離 心 機 ( 德 國 Eppendorf 公 司) ; Labcycler 定量 PCＲ 擴增儀( 德國 SensoQuest 公司) 。

2 方法

72 只大鼠隨機取 12 只作為正 常組，灌胃給予 250 mg /kg 蒸餾水; 其余大鼠灌胃 給藥 250 mg /kg 2. 5%腺嘌呤混懸液，第 1～14 天每 天 1 次，第 15～28 天隔天 1 次。第 29 天，將造模 大鼠隨 機 分 為 模 型 組、愛 西 特 組 ( 450 mg /kg ) 及冬瓜 皮 炭 低、 中、 高 劑 量 組 ( 300、 450、 600 mg /kg) 。造 模 結 束 后，愛西特組大鼠按 450 mg /kg劑量灌胃，冬瓜皮炭高、中、低劑量組 大鼠分別按 600、450、300 mg /kg 劑量灌胃; 正常 組、模型組大鼠按等體積蒸餾水灌胃，制作大鼠體 質量 ( g) 與給藥量 ( mL) 對照表，每 2 d 稱 1 次 體質量，按其變化增減給藥量，持續 15 d，其間大 鼠自由攝食、飲水。第 15 天給 藥 1 h 后，各 組 大 鼠 用 1% 戊 巴 比 妥 鈉 ( 0. 01 mL /g) 麻醉，腹主動脈取血5 mL，3 000 r/min 離心 15 min，分離血清，按 ELISA 試劑盒說明書 步驟檢測 BUN、SCr、TGF-β1、PAI-1 水平。取大鼠腎臟作石蠟切片， 分別進行 HE 染色 ( 蘇木素染色液染色 10 min，浸 入自來水中洗去多余染色液，約 10 min，蒸餾水再 洗滌 1 次，95% 乙醇 浸 泡 5 s，伊紅染色液染色 2 min) 、Masson 染色，光鏡下觀察大鼠腎組織病 理形態變化。

3 結果

模型組大 鼠局灶性間質纖維化，大量炎細胞浸潤，腎間質重 度纖維化增生，腎小囊腔明顯擴張; 愛西特組、冬 瓜皮炭高劑量組大鼠腎小管輕度擴張，腎小管上皮 細胞輕度空泡樣變性，腎間質輕度纖維化，腎間質 可見少量炎細胞浸潤，腎小囊腔輕度擴張，其中后 一組囊腔擴張程度更低，組織學變化更少。模型組大鼠腎小管腎間質重度纖維化，擴張腎 小管嚴重; 冬瓜皮炭高劑量組大鼠腎間質輕度纖維 化，腎小管、腎小囊腔輕度擴張。

4 討論

慢性腎功能衰竭可對腎組織產生漫長性、進行 性的實質性、功能性損害，從而導致不同組織、生 化、內分泌等全身代謝紊亂組成的臨床綜合征，具 有不可逆轉的特征，癥狀包括腎小球濾過率下降腎臟代謝發生紊亂，最終誘發終末期腎病和腎功能 進一步惡化，患者需要終身依賴腎臟透析或腎臟移 植才能獲得生存的權利，我國成年人中發病率達 10. 8%，需要及時預防和診治。



 

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